- по цитопатическим изменениям в клетках;
- по способности эритроцитов адсорбироваться на цитоплазматической мембране инфицированных клеток;
- в реакции вирусной гемагглютинации;
Основным признаком репродукции вируса в культуре клеток служит цитопатический эффект (ЦПЭ). Он проявляется округлением и зернистостью клеток, нарушением монослоя, вакуолизацией цитоплазмы, образованием синцитиев, внутриклеточных включений или лизисом клеток. Выраженность и характер ЦПЭ зависят от вида вируса, клеточной линии и продолжительности инкубации; отсутствие изменений не исключает вирусную инфекцию.
Гемадсорбция возникает при экспрессии вирусных гемагглютининов на цитоплазматической мембране инфицированных клеток: эритроциты фиксируются на поверхности таких клеток. В реакции вирусной гемагглютинации вирусные частицы, содержащие гемагглютинин, связывают эритроциты во взвеси и вызывают их равномерную агглютинацию. Эти методы особенно информативны для вирусов с гемагглютинирующей активностью и позволяют выявлять вирус даже при слабом или отсутствующем ЦПЭ.
| Метод | Механизм | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Оценка цитопатических изменений | Повреждение и гибель инфицированных клеток | Непрямое выявление репродукции вируса в культуре |
| Гемадсорбция | Адсорбция эритроцитов на мембране клеток, экспрессирующих вирусный гемагглютинин | Выявление инфицированных клеток при наличии гемадсорбирующих свойств вируса |
| Вирусная гемагглютинация | Перекрёстное связывание эритроцитов вирусными гемагглютининами | Обнаружение и количественная оценка гемагглютинирующей активности вируса в культуральной жидкости |
| Электронная микроскопия | Визуализация вирусных частиц | Морфологическое подтверждение; сама по себе не доказывает активную репродукцию вируса в культуре |
Визуальная оценка без микроскопических, культуральных или серологических критериев неспецифична. Электронная микроскопия имеет значение для непосредственной визуализации вирионов, но выявление цитопатического эффекта, гемадсорбции и гемагглютинации относится к классическим методам индикации вируса в заражённой культуре клеток.
Тесты с ответами по специальности «вирусология» для аттестации на категорию.