- акриламидный или агарозный гель;
Разделение фрагментов ДНК и РНК при электрофорезе проводят в геле, погружённом в буфер и помещённом в электрическое поле. Гелевая матрица создаёт молекулярное сито: фрагменты нуклеиновых кислот перемещаются к положительно заряженному электроду, причём более короткие молекулы проходят через поры быстрее и удаляются от лунок на большее расстояние.
Агарозный гель применяют преимущественно для разделения средних и крупных фрагментов ДНК, а полиакриламидный — для коротких фрагментов с высокой разрешающей способностью, включая продукты секвенирования и малые ампликоны. После окрашивания фрагменты визуализируют в ультрафиолетовом или синем свете с использованием соответствующих флуоресцентных красителей.
Клонированный фрагмент ДНК может служить контролем или стандартом, термостойкая полимераза используется в ПЦР, рестрикционные ферменты расщепляют ДНК в определённых сайтах, а векторная последовательность обеспечивает клонирование и перенос генетического материала. Эти компоненты не являются средой, в которой непосредственно происходит разделение молекул.
| Компонент | Основное назначение | Применение в лабораторной генетике |
|---|---|---|
| Агарозный гель | Разделение ДНК и РНК по размеру | Анализ продуктов ПЦР, рестрикционных фрагментов, крупных молекул ДНК |
| Полиакриламидный гель | Высокоразрешающее разделение коротких фрагментов | Анализ малых ампликонов, фрагментов секвенирования, отдельных белков |
| Термостойкая полимераза | Амплификация ДНК | Проведение ПЦР до электрофореза |
| Рестрикционные ферменты | Специфическое расщепление ДНК | Подготовка фрагментов для анализа или клонирования |
Тесты по специальности «лабораторная генетика» с ответами для прохождения аттестации.